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Potencialidades da utilização de compostos de ródio na confecção de sensores eletroquímicos: uma breve revisão

INTRODUÇÃO Recentemente, dado ao grande potencial catalítico dos compostos de ródio1-3, comparados com os de outros metais de transição, tem havido grande interesse na utilização destes em sensores eletroquímicos. O ródio existe, principalmente, nos estados de oxidação 0, I, II, e III, sendo o III mais estável na maioria dos complexos, e o I em organometálicos3-6. Enquanto o ródio metático tem sua ação mediadora bem estabelecida com aplicação em sistemas para detecção de lactato7-10, os derivados, ou melhor, seus complexos englobam uma classe cuja potencialidade é muito ampla, em termos da faixa de potencial a ser utilizada11-22. Entre os fatores importantes no estabelecimento dessa faixa de potencial citaríamos o estado de oxidação do metal e os ligantes envolvidos11- 25. Outro ponto a ser considerado é que o ródio, como os demais metais do grupo da platina, após introdução da cisplatina no arsenal terapêutico contra tumores, vem sendo, também, investigado por suas propriedades biológicas24-33.

Em função da atividade biológica de compostos de ródio, torna-se relevante a confecção de biossensores desse elemento para auxiliar no estudo do mecanismo de ação desses complexos no organismo animal. No campo de biossensores, é importante frisar que a habilidade destes metais de transição em se ligarem com biomoléculas tais como enzimas e DNA, deve ser também explorada24-33, haja visto que, em sistemas vivos, proteínas e DNA são capazes de transferir elétrons a longa distância e que se atribui a atividade destes complexos a interferências nestes mecanismos de transferência de elétrons34-41.

Eletrodos a base de DNA, já bem estabelecidos na literatura42-47, mostraram-se promissores, especialmente para a investigação de fármacos com ação sobre o DNA, entre estes os nitroimidazólicos48-50, fenotiazínicos 51 e derivados platínicos52. Os complexos de ródio, cujo mecanismo de ação biológica se assemelha em alguns aspectos ao dos compostos platínicos, poderiam também ser investigados através de modelos semelhantes. Também tem sido citada na literatura53 a potencialidade do uso de complexos eletroativos seletivos como indicadores de hibridização. Esse fato dá margem ao desenvolvimento de eletrodos, a base de DNA, modificados por complexos de ródio, visando tanto estudos de hibridização, quanto a mediação e o aperfeiçoamento das estratégias de imobilização de reagentes biológicos em biossensores54,55. A utilização de metais de transição com intuito de se aperfeiçoar sensores eletroquímicos, visando facilitar a transferência eletrônica enzima-eletrodo e proporcionar um aumento da seletividade e sensibilidade, tem recebido atenção especial dos pesquisadores da área de eletroanalítica7-10,56-60. Harwood & Pouton, em recente revisão56, relataram os complexos de ródio como sendo promissores mediadores para confecção de biossensores. Portanto, pretende-se relatar aqui as características eletroquímicas dos principais compostos de ródio que vêm sendo utilizados, no intuito de se desenvolver novos sensores eletroquímicos.

No presente, pode-se citar, entre os compostos mais promissores, e até aqui mais investigados, o ródio metálico (micropartículas), os carboxilatos de ródio (II) e os complexos com ligantes heterocíclicos nitrogenados naftiridínicos, bipiridínicos, terpiridínicos, entre outros7-23, 56-73.

RÓDIO METÁLICO Embora o interesse deste elemento quanto às suas propriedades biológicas, no estado metálico, seja praticamente nulo, suas potencialidades em catálise levaram à utilização deste elemento na confecção de eletrodos. Neste sentido, partículas finamente divididas de ródio foram dispersas em eletrodos de pasta de carbono, e vêm sendo extensivamente testadas na confecção de biossensores seletivos para lactato7-10.

Biossensores para lactato, utilizando este tipo de eletrodo e lactato oxidase imobilizada, operam em potenciais onde reações indesejadas são evitadas.

Atribuiu-se este aumento de seletividade à efetiva ação catalítica das micropartículas de ródio, concernente à geração de peróxido de ródio em menores potenciais9. O esquema abaixo ilustra a conversão de lactato a piruvato pela enzima, com formação de H2O2.

LACTATO + Lox (FAD) ® PIRUVATO + Lox (FADH2) Lox (FADH2) + O2 ® Lox (FAD) + H2O2 2H2O2 + Rh «Rh(H2O2)2 Lox(FAD)+ Rh(H2O2)2« Rh + Lox(FADH2) + 4OH- Sistemas eficientes para detecção de lactato encontram importantes aplicações no campo clínico, de fermentações e produtos alimentícios. O sistema citado acima apresentou potenciais na faixa de -0,1 e 0,25V9.

Utilizando o mesmo princípio, outras enzimas oxidases foram imobilizadas, sendo utilizado ródio disperso em filme polimérico, ambos depositados eletroquimicamente sobre carbono vítreo10. Neste caso, a detecção do substrato pode ser monitorada via O2ou H2O2. No caso da detecção via O2, há a vantagem de se poder trabalhar em potenciais mais negativos, aumentando a seletividade. Em contrapartida, este sistema apresenta baixa sensibilidade7-10, o que evidencia a necessidade de se tentar reduzir os potenciais de operação para H2O2. No sistema em questão, a eletrodeposição de ródio, em carbono vítreo, mostrou-se igualmente eficiente na redução catalítica dos potenciais de operação, com as seguintes vantagens: menor adsorção de H, C=O e O, maior área de contacto oferecida para estas micropartículas e, ainda, melhor relação sinal/ruído, quando comparado com Pd e maior sensibilidade na detecção de glicose, quando comparado com Cu0 10.

As propriedades eletroquímicas do ródio metálico têm sido bem investigadas57, e por possuir algumas propriedades catalíticas e eletroquímicas vantajosas, o desenvolvimento de novas técnicas de eletrodeposição, dispersão e fixação do metal no eletrodo é ainda um campo de trabalho a ser explorado.

CARBOXILATOS DE RÓDIO E ANÁLOGOS Ao contrário do Rh(0), os carboxilatos de ródio(II) (Fig._1), entre os compostos de ródio, são os mais estudados, devido às suas propriedades antitumorais29-33,61-69, além de seu possível emprego em catálise61-63. As propriedades desses compostos são bastante influenciadas pelos 4 ligantes equatoriais (R), ligados em ponte, e pelos dois ligantes axiais (L), geralmente lábeis24,33,61-70.

Embora a força de ligação desses ligantes dependa dos efeitos eletrônicos dos substituintes, o fator preponderante na atividade biológica está provavelmente relacionado com as características de lipossolubilidade24. Estudos eletroquímicos de uma série de carboxilatos, em que se utilizaram diferentes ligantes equatoriais, estabeleceram que parâmetros eletrônicos exercem grande influência nos potenciais redox, podendo estes variarem de 1,0 a 1,8V64.

É provável que o mecanismo de ação biológica dos dímeros de Rh(II), esteja vinculada às reações nas posições axiais (L), com sítios contendo átomos de enxofre ou nitrogênio, e mais especificamente, com enzimas contendo grupos tióis, como as polimerases29,30. Por outro lado, a força das ligações axiais, entre o centro de Rh(II) e o átomo coordenante das moléculas existentes no meio biológico deve depender, pelo menos em parte, de mecanismos de transferência de elétrons11,12,64,67,68, com geração de radicais livres e a consequente cisão em moléculas de DNA e/ou proteínas40,41. Em trabalhos recentes, foi constatado68, para os lactatos e gliconatos de ródio, hidrossolúveis, que o derivado mono- hidroxilado se ligava de modo irreversível à amônia, enquanto o derivado poli- hidroxilado ligava-se labilmente. Neste trabalho68 também se comprovou maior atividade citostática in vitro para lactato frente às células leucêmicas humanas K-562. Neste último caso, os parâmetros de solubilidade eram semelhantes, sendo as maiores mudanças atribuídas aos fatores estéricos e eletrônicos. No sentido de se verificar a influência de fatores eletrônicos sobre potencial do par redox Rh2(II)/Rh2(II,III), uma série de carboxilatos [ (RCOO)4Rh2], em que os substituintes R foram escolhidos sistematicamente com base em diferentes valores de 4s* (soma de efeitos indutivos e polares nos 4 substituintes), foi sintetizada e estudada por voltametria cíclica64. A tabela 1 ilustra os resultados obtidos em DMF.

No estudo em questão, constatou-se que substituintes mais eletrocaptores como TFA, deslocavam os potenciais positivamente, enquanto substituintes doadores como isopropil causavam o efeito contrário. A faixa de potencial pode ser ainda mais estendida, à medida que se substituem carboxilatos por amidatos, chegando, a um potencial de 0,15V para acetamidatos11,12, o que indica a potencialidade destes para sensores. Neste caso trocando-se o átomo de ligação direta por outro menos eletronegativo, no caso O por N, aumenta-se ainda mais a densidade eletrônica sobre o metal, estabilizando estados de oxidação mais altos11,12.

Num outro estudo onde se variou gradativamente a proporção de ligações diretas de oxigênio por nitrogênio verificou-se que para cada acetato que era trocado por acetamidato, na estrutura em gaiola do dímero, houve deslocamento para potenciais mais negativos de cerca de 200 mV1,12. A influência do solvente sobre este deslocamento, também foi marcante. Em solventes mais doadores como acetonitrila e piridina, este deslocamento foi de 220 e180 mV respectivamente, sendo que para dimetilssulfóxido e trifenilfosfina (0,1M em diclorometano) decrescia para 120 e 90 mV, respectivamente64.

Todas as reações de oxidação Rh(II)/Rh(II,III) foram reversíveis ou quasi reversíveis, com separação de picos (Epa-Epc) entre 60 e 80 mV11,12, características estas favoráveis e de grande utilidade na construção de sensores.

Ainda seguindo a idéia de se variar os ligantes equatoriais, no sentido de se reduzir potenciais, aumentando a seletividade, foi sintetizado o dímero com N, N' difenilbenzamidina [(RCR2NN)4]Rh2, ligante este que apresentava dois nitrogênios como átomo de ligação direta13.

Comparando-se os carboxilatos com amidatos e este ligante dinitrogenado, observa-se que enquanto estes sofrem oxidação simples, ligantes mais básicos como amidatos sofrem 2 oxidações reversíveis formando espécies diméricas do tipo Rh(II,III) e Rh(III,III)11-15. Além do mais, redução reversível com formação de espécies Rh(II,I) não tem sido observada para os carboxilatos, sendo, entretanto, possível nestes ligantes dinitrogenados, cujo voltamograma apresentou 3 pares redox reversíveis a potenciais positivos com DEp de 60 mV e 1 par redox a potencial mais negativo quasi reversível DEp de 90 mV 13. Os potenciais de oxidação deslocaram negativamente para 290 e 460 mV (CH3CN x SCE) respectivamente, quando comparados com medidas feitas nas mesmas condições, para fenilacetamidato14,15.

Outros complexos dinucleares também estudados foram sulfatos e fosfatos de Rh (II) e Rh(III)16,70,71, admitindo-se a existência de complexos polinucleares de íons SO42-com Rh em estados de oxidação mistos70. Observou-se, nesses compostos por voltametria cíclica, que o DEp dependia da velocidade de varredura, sendo muito maior que 60 mV, caracterizando um sistema irreversível da reação70, ao contrário dos análogos acetatos onde DEp=30 mV e independe da velocidade de varredura. Constatou-se, também, uma relação linear entre a raiz quadrada da velocidade de varredura e a corrente de pico, indicando que o transporte de massa é limitado por difusão16,70.

O processo de redução polarográfica depende do pH e envolve doadores de prótons, estando de acordo com Guillhard70, que sugeriu estar o H+envolvido na esfera de coordenação. Os possíveis produtos de adsorção são compostos do tipo Rh(II)-Rh(I), Rh2(I) e H2.

Fosfatos e sulfatos de ródio apresentam algumas semelhanças quanto ao comportamento eletroquímico70, cujos pares redox, obtidos através de polarografia, são exibidos na tabela_2.

Voltamogramas cíclicos registrados em solução de fosfatos de Rh(III) e Rh(II) exibiram três picos catódicos, a potenciais de 0,05V, -0,30V e -0,45V e 2 picos anódicos a 0,23V e 0,35V 71.

A baixa estabilidade destes complexos confirma o mecanismo proposto para análogos acetamidatos e carboxilatos, onde constatou-se que ligantes mais básicos estabilizavam estados de oxidação mais altos71. A eletrodeposição de Rh0 em eletrodos sólidos origina superfícies estáveis e catalíticas para o desenvolvimento de eletrodos quimicamente modificados70,71. Em resumo sulfatos e fosfatos poderiam constituir-se numa alternativa como materiais de partida na eletrodeposição de micropartículas de ródio metálico.

Já os carboxilatos, acetamidatos e análogos dinitrogenados, em virtude dos baixos potenciais apresentados são promissores para a confecção de sensores e biossensores a serem utilizados na elucidação do mecanismo de ação dos carboxilatos de ródio e serem empregados nos estudos de REA (relação estrutura atividade). A interação com proteínas e outras biomoléculas pode ter inúmeras aplicações potenciais, tanto na imobilização destes complexos em sensores, quanto no uso destes para análises de moléculas de interesse biológico.

COMPLEXOS DE RÓDIO COM LIGANTES HETEROCÍCLICOS NITROGENADOS Naftiridínicos A busca por ligantes que coordenam com dois centros metálicos em proximidade, possibilitando ligações metal-metal17,18, visa a obtenção de propriedades peculiares como o sinergismo e mediação18. Oxo complexos de rutênio17,18, binucleares de interesse em catálise homogênea, apresentaram bons resultados na oxidação homogênea da H2O em H2O2. Complexos com os ligantes tetradentados naftiridínicos (Fig._2) foram primeiramente sintetizados a partir de acetato de ródio17.

As propriedades eletroquímicas desses compostos foram investigadas (ref.

calomelano), tendo sido observado um potencial reversível de oxidação à 1,28V, e ao contrário dos carboxilatos, dois potenciais reversíveis de redução à -0,57 e -1,29V, podendo ser atribuídos à relativa rigidez deste ligante que, além de minimizar os efeitos estéricos, eleva o potencial catalítico17,18. O deslocamento do par redox Rh2(III/II)/Rh2(II) de 300 mV para potenciais mais positivos foi atribuído a ausência de efeitos eletrodoadores de carga negativa presentes em acetatos e ausentes nestes ligantes neutros e são doadores pobres17,18.

Estes complexos poderiam ser utilizados na confecção de sensores para detecção de analitos em que ocorre a geração de H2O2, tais como biossensores contendo enzimas oxidases como agentes de reconhecimento molecular.

Bipiridínicos Complexos polipiridínicos de Rh(III) têm provado ser muito ativos em vários sistemas catalíticos19-21. Vários complexos têm sido sintetizados com intuito de se buscar novos eletrodos modificados com Rh(III) para redução eletrocatalítica de prótons19,20, em processos de hidrogenação ou redução fotoquímica da H2O21 e regeneração de NADH19-21. O comportamento eletroquímico destes complexos envolvem redução com transferência bieletrônica lenta, centrada no metal, na transição Rh(III)/Rh(I), de caráter irreversível, seguido por reduções quasi-reversíveis do ligante20,21. A redução bieletrônica está, em geral, associada à perda de íons cloreto e ocorre em potenciais abaixo de -1,5V 20,21. A reoxidação pode envolver recoordenação com íons cloreto ou novo complexo com solventes coordenantes, dependendo portanto, das condições experimentais19-21. A adição de íons cloreto diminui a diferença dos potenciais catódicos e anódicos do sistema Rh(III)/Rh(I)21. A presença de substituintes mais eletrocaptores sobre o anel bipiridínico (bpy)tem marcado efeito estabilizador sobre baixos estados de oxidação nestes complexos com metais de transição20.

Este efeito também foi observado quando se utilizou fenantrolina (Fig._3)como ligante, a qual possui um grupo fenila adicional em ressonância21.

O efeito de adsorção na superfície do eletrodo está associado com o solvente utilizado, e aumenta em solventes coordenantes como CH3CN e DMSO20. A eletropolimerização é viabilizada mais uma vez pela presença de grupos pirrólicos (Fig._4), e ocorre através de oxidação irreversível em potenciais controlados ao redor de 1V 20. A espessura do filme pode ser aumentada por sucessivas varreduras a potenciais entre -1,55 e 1 V. Estes valores deslocam-se para potenciais extremos, respectivamente negativo e positivo, à medida que o filme cresce20. Os filmes finos foram mais eletroativos e complexos reduzidos parecem mais estáveis, quando eletropolimerizados20, exibindo alta atividade eletrocatalítica e estabilidade frente à geração H219,20.

Terpiridínicos Seguindo a mesma filosofia e considerando a atividade catalítica homogênea do Rh(terpy)23+(Fig._5)naredução fotoquímica de NAD+ foram descritos eletrodos modificados por eletropolimerização a 1,4V em carbono vítreo (RCV) de espécies onde o complexo bis-terpiridina é covalentemente ligado a 2 grupos pirrólicos22. O eletrodo modificado foi avaliado na regeneração de NAD+a NADH e comparado com eletrodo de RCV não modificado22. Esse eletrodo também foi investigado em sistema onde se utilizou ciclohexanona e álcool desidrogenase, formando ciclohexanol (Fig._6).

A regeneração de NAD+ a NADH não enzimática requer transferência concomitante de 2 elétrons e 1 próton para NAD+, resultando geralmente numa mistura contaminada por espécies inativas ou parcialmente ativas. A maior eficência e seletividade foi obtida em potencial de -0,80 V. Constatou-se boa atividade destes eletrodos de carbono vítreo modificados na redução de NAD+, sendo a eficiência destes superior quando comparados a eletrodos modificados com outros complexos de ródio, com ligantes bipiridínicos e a espécie Rh(terpy)23+quando em solução22.

OUTROS COMPLEXOS Entre outros complexos de ródio estudados por eletroquímica merecem ser citados os s-acetiletos, complexos bimetálicos, e tetranucleares.

s-acetiletos Fáceis de serem introduzidos à estrutura metálica(Fig.7), vêm ganhando interesse em catálise. Apresentam alta reatividade, sendo oxidados mono eletronicamente de modo quasi reversível73. Dada à sua alta reatividade, estes complexos poderiam ser utilizados na confecção de eletrodos para análise em fluxo.

Complexos bimetálicos tetranucleares Foram sintetizados com ligantes bipiridínicos, biquinolínicos e piridilpirazínicos, porém apresentam baixa estabilidade e são de difícil síntese, sendo necessário investigar ligantes que assegurem estado de oxidação e propriedades desejadas74. Apesar da dificuldade sintética, não se descarta a hipótese do uso destes na confecção de sensores, especialmente pelas promissoras propriedades sinérgicas destes compostos com múltiplos centros metálicos.

Complexos de ródio halogenados Apresentam-se eletroativos, respondendo em processos de redução em potenciais negativos de 0 à -0,99 V75, podendo, então, funcionarem como uma alternativa para detecção de analitos oxidáveis ou redutíveis, em baixos potenciais.

Complexos bimetálicos de Rh(I) Os complexos de Rh(I) mostraram-se facilmente oxidáveis, num processo envolvendo 2 elétrons resultando em espécies dinucleares de Rh(II). Na troca de Rh por Ir, observou-se deslocamento negativo dos potenciais de oxidação de 0,88 para 0,80 V, em CH2Cl2,e de 0,44 para 0,16 V, em CH3CN76. Isso pode ser explicado pelo fato de que solventes doadores como CHCN3deslocam para potenciais negativos, por adição do solvente ao produto de oxidação, exercendo, assim, maior estabilização da forma reduzida. Estes efeitos de adição são maiores em complexos de ródio. Já a troca por substituintes mais fortemente p- ácidos desloca para potenciais positivos, devido ao decréscimo na densidade eletrônica sobre o metal de coordenação. A oxidação mostrou-se, em todos casos, centrada no metal76.

PERSPECTIVAS DA APLICAÇÃO DE COMPOSTOS DE RÓDIO EM SENSORES ELETROQUÍMICOS Apesar do custo relativamente elevado, os metais nobres apresentam grande potencial em catálise, sendo úteis portanto para o desenvolvimento de novos sensores eletroquímicos. O ródio apresentou em alguns sistemas de melhor desempenho em relação a outros metais do grupo da platina7-10,56.

Entre os derivados de ródio mais promissores podem ser citados: Os amidatos de ródio, em função da possibilidade de estabelecer ligações axiais mais lábeis, e portanto, podendo ser utilizados na detecção de bases nucleotídicas, aminoácidos ou outras moléculas contendo sítios doadores com nitrogênio ou enxofre, envolvendo fármacos e/ou metabólitos.

Complexos N, N' amidínicos, assim como os amidatos, sofrem reações redox reversíveis em baixos potenciais podendo estes mediarem vários processos eletroquímicos, em sistemas complexos, livres de interferências.

Complexos hetererocíclicos nitrogenados que se mostraram úteis, especialmente em sistemas via H2O2 . E, finalizando, em virtude dos bons resultados obtidos com micropartículas de Rh0, sulfatos e fosfatos poderiam constituir-se numa boa alternativa para eletrodeposição deste metal em eletrodos.

CONCLUSÕES Em vista do estado da arte os compostos de ródio, constituem-se numa alternativa promissora na confecção de sensores eletroquímicos, em função da grande possibilidade de variação de suas propriedades de transferência de elétrons e de modulação dos potenciais redox via variação dos ligantes. Convém ressaltar que a interação com proteínas, em especial as enzimas, pode-se constituir numa estratégia favorável, tanto numa imobilização mais adequada quanto na mediação dos processos de transferência de elétrons com objetivo de aperfeiçoar os biossensores já existentes.